健康

PCR分析:是什麼呢? 如何利用PCR分析

這不是很久以前開發的各種感染性疾病在人類中的診斷可靠,高度敏感和快速的方法。 這種方法被稱為“PCR分析”。 這是什麼,什麼是 它的本質,他能識別微生物,以及如何利用它,我們將在本文中描述。

發現的歷史

發明了聚合酶鏈反應(PCR)是美國科學家凱麗Myullis在1983年最初,專利 診斷的方法 通過“鯨魚座公司”,在其中他工作和它的創建者。 但在1992年的所有權利和專利權出售給該公司“霍夫曼 - 羅氏”。 在此之後,事實證明,類似的研究,平行進行,並通過其他美國生物學家,如伊利斯陳大衛·埃德加,約翰RRE的報導。 1980年,他從事這一問題,蘇聯科學家A. Slyusarenko A.卡列金及 S. Gorodetsky。 因此,確定的唯一版權所有者已不可能。 許多傑出的生物化學家到聚合酶反應的方法的發展作出了貢獻,歐洲核子研究中心的專利他們的創新。 在PCR的這點分析,在整個專門配備的實驗室進行。

發明內容PCR診斷

PCR分析:它是什麼,它是如何工作的? 該方法的本質在於以下事實:通過在體外使用一個特殊的酶的DNA聚合酶在特定體積的微生物環境增加。 要做到這一點反复多次使用的DNA材料。 因此,病原體的樣品中的存在量將在生化實驗室操作的費用增加了,和細菌不會很難在顯微鏡來檢測。

如何為材料的研究?

開展所需的分析:

  • DNA模板;
  • 引物材料連接所述片段的端部;
  • 熱穩定DNA聚合酶;
  • 化學品,確保酶的適當操作;
  • 緩衝溶液是必需的,用於創建用於DNA材料的生長和發展的適當條件。

為了進行PCR操作25-30重複包括三個步驟:變性,退火和延伸。

使用一種特殊的裝置分析polimezarnoy鍊式反應 - 循環儀。 現代化的設備可以安裝必要的加熱和冷卻程序管在診斷期間,以消除誤差。

凡申請診斷?

Polimezarnoy鍊式反應方法在醫藥各種領域中使用:

  • 法醫使用它來識別的遺傳物質,例如毛髮,唾液或血液;
  • 的血液PCR分析有助於基因分型,例如用於檢測個體遺傳種植響應於特定藥物;
  • 通過人與人之間的方法設置親情;
  • 最受歡迎的PCR方法已成為醫學診斷測定各種感染性疾病的。

什麼感染揭示PCR?

因此,醫學長期以來一直成功用於PCR分析。 這是什麼,我們已經學會了。 而一些病原體可以用它來檢測? PCR診斷下列 感染 :

  • 肝炎A,B,C;
  • ureaplasmosis;
  • 念珠菌病;
  • 衣原體;
  • 支原體病;
  • 細菌性陰道炎;
  • 傳染性單核細胞,
  • 滴蟲病;
  • HPV感染;
  • 結核;
  • 的第一和第二類型的皰疹感染;
  • 幽門螺桿菌感染;
  • 巨細胞病毒;
  • 白喉;
  • 沙門氏菌;
  • HIV感染。

此外,在癌症的診斷中使用的PCR方法。

該方法的優點

診斷PCR有幾個優點:

  1. 高靈敏度。 甚至只有少數DNA分子微生物PCR分析確定感染的存在。 它有助於慢性和潛在的疾病發生的方法。 通常在這種情況下,微生物在其他方面未開墾。
  2. 為了調查任何合適的材料,如唾液,血液,性選擇,毛髮,上皮細胞。 最常見的是驗血和泌尿生殖拭子PCR。

  3. 不要求延長生長的培養。 診斷的自動化過程允許4-5小時後,得到的研究結果。
  4. 該方法幾乎完全是真實的。 記錄的假陰性結果只是個別事件。
  5. 能力,以確定在一個樣品材料幾種類型的病原體。 這不僅加速了疾病診斷的過程中,也顯著降低了材料成本。 通常情況下,醫生開的PCR進行綜合分析。 價格調查,包括確定的六個病原體,是約1500盧布。

在分析準備的建議

其結果是有效的PCR研究中需要進行測試,以下為診斷的前期準備工作的建議:

  1. 輸送唾液的前應當從飲食和藥物4小時之前採樣所述材料避免。 在手術前,立即用清水沖洗白開水漱口。
  2. 上述規則必須採取從臉頰的內部的樣品時,可以引導和。 清洗後,建議進行輕柔按摩對皮膚釋放的前列腺分泌物。
  3. 尿液通常在家裡收集。 要做到這一點,你需要進行生殖器的徹底廁所。 在無菌的塑料容器是必要收集50-60毫升的尿液。 它建議為婦女將棉塞插入陰道內,而男人盡可能地拉扯皮膚褶皺,保證了材料的純度。 月經期間,你不能拿材料。
  4. 用於遞送的精子過程中的材料的收集前的3天,以從性交棄權。 此外,醫生建議放棄使用桑拿和熱水浴,酒及辛辣食物。 3小時是必要在分析之前從排尿不要。
  5. 要通過泌尿生殖器的塗片,例如,如果一個衣原體PCR分析,男女雙方建議性休息3天。 分析前2週不能服用抗生素。 一個星期,你需要停止使用的親密凝膠劑,軟膏劑,栓劑陰道,沖洗。 之前的研究3小時應該從小便避免。 月經期間圍欄材料沒有進行,點滴結束後只有3天可以採取泌尿生殖器的塗片。

懷孕期間PCR

一個嬰兒的等待時間,許多傳染病,性病,對於胎兒的正常發育非常危險的。 性病可以引起胎兒宮內發育,流產或早產,孩子的先天畸形。 因此,在孕早期篩查PCR得到它是非常重要的。 通過註冊時分析是必要的 - 長達12週。

護欄網材料來自一個特殊的刷子在宮頸管。 該過程是無痛的,不造成危險的嬰兒。 通常妊娠衣原體PCR法,以及ureaplasmosis,支原體病,巨細胞病毒,皰疹,乳頭狀瘤病毒分析中。 所謂PCR 6這樣的檢查複雜。

PCR艾滋病毒的診斷

由於這樣的事實:聚合酶鍊式反應的方法是在身體的變化和診斷的條件很敏感,許多因素會影響結果。 對於HIV感染因此PCR分析是一種可靠的方法,其效率 - 96-98%。 測試的剩餘2-4%給出假陽性結果。

但是,在沒有艾滋病毒的PCR診斷某些情況下無法做到的。 通常情況下,它被帶到人與假陰性ELISA。 這些數字表明,人還未發展中的病毒抗體,也不會增加多的數量不能被檢測到。 這可以通過進行驗血PCR方法來實現。

此外,還需要為孩子的診斷生命的第一年,出生HIV陽性的母親。 該方法是可靠地確定孩子的身份的唯一途徑。

PCR用於肝炎的診斷

聚合酶鏈反應方法允許形成抗體與感染或症狀發作之前以及肝炎A,B,C,的病毒DNA的檢測。 特別有效的是丙型肝炎的PCR分析,因為這種疾病的85%是無症狀的和不及時治療變成慢性。

病原體的及時發現將有助於避免並發症和長期治療。

綜合PCR篩選

綜合分析PCR: 是什麼呢? 此 篩選方法polimezarnoy鍊式反應該方法包括同時確定幾個物種感染:生殖支原體,人型支原體,陰道加德納菌,念珠菌,滴蟲,巨細胞病毒, 解脲urealitikum, 皰疹第一和第二類型,淋病乳頭瘤病毒。 這個診斷的價格範圍從2000到3500盧布。 取決於診所,材料和設備,以及對分析的類型:定性或定量。 需要你的情況是什麼 - 醫生決定。 在某些情況下,你只需簡單地檢測其他諸如HIV,通過定量滴度發揮的重要作用的病原體的存在。 被稱為在所有上述病原體檢查的診斷“12的PCR分析”。

解讀分析結果

轉錄PCR分析是直接的。 有2只指數量表 - “正面”和“負面”。 當檢測到病原體可與99%的置信醫生-Th確認疾病的存在,並開始治療患者的。 在檢測到的細菌的對應列索引號確定感染的定量方法將被指定。 只有醫生可以判斷疾病的嚴重程度,並規定必要的治療。

在一些情況下,例如在確定HIV感染通過PCR,用否定的結果,有必要進行額外的調查,以確認這些數字。

哪裡可以得到測試?

凡通過-PCR分析,在公共診所或私人實驗室? 不幸的是,在市級醫療機構的設備和方法往往是過時的。 因此,最好優先考慮擁有現代化的設備和高素質的人員私人實驗室。 此外,在一家私人診所,你得到的結果要快得多。

在莫斯科,許多私人實驗室提供各種感染PCR分析。 例如,在這樣的診所“生活”,“綜合診所”,“快樂家族”,“泌尿臨”,進行PCR分析。 調查的價格是200盧布。 用於確定病原體。

由此可以得出結論,傳染病通過PCR在大多數情況下,診斷是在感染的早期階段檢測在體內的病原體的快速和可靠的方式。 然而,在某些情況下,選擇診斷的其他方法。 確定需要這樣的學習只能是一個專家。 PCR分析解密也需要一個專業的方法。 按照醫生的建議,不要給他們自己的測試,這是沒有必要的。

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